Depositi di α-sinucleina fosforilata nelle sinucleinopatie: caratterizzazione delle popolazioni neuronali periferiche in biopsie cutanee di pazienti

Le sinucleinopatie sono un gruppo di malattie neurodegenerative caratterizzate dall’accumulo patologico di α-sinucleina nel sistema nervoso centrale e periferico. Tra le principali rientrano la malattia di Parkinson (PD), la demenza a corpi di Lewy (DLB) e l’atrofia multisistemica (MSA). Queste patologie condividono la presenza di aggregati di α-sinucleina, ma hanno decorso clinico e prognosi differenti. Tuttavia, nelle fasi iniziali possono manifestarsi con quadri clinici sovrapponibili, rendendo la diagnosi differenziale complessa. Negli ultimi anni la biopsia cutanea è emersa come importante strumento di supporto alla diagnosi, altamente specifico e sensibile. La cute rappresenta infatti un tessuto facilmente accessibile con una ricca rete di fibre nervose, sia somatosensoriali sia autonome, nelle quali è possibile identificare aggregati neuropatologici analoghi a quelli riscontrati nel sistema nervoso centrale. In particolare, mediante la tecnica dell’immunofluorescenza (IF) è possibile identificare depositi di α-sinucleina fosforilata (Ser129p-α-syn) nelle fibre nervose cutanee. Tuttavia, non è ancora completamente chiarito se la deposizione della proteina coinvolga selettivamente specifiche popolazioni di fibre nervose. Pertanto, l’obiettivo di questa tesi è caratterizzare i diversi sottotipi di fibre nervose cutanee coinvolte dalla deposizione di Ser129p-α-syn e valutare eventuali differenze tra PD, DLB ed MSA. A questo scopo sono stati utilizzati diversi marcatori neuronali: neuropeptide Y (NPY), per fibre autonomiche vasomotorie; calcitonin gene-related peptide (CGRP), per fibre peptidergiche; vasoactive intestinal peptide (VIP), per fibre autonomiche parasimpatiche; tirosina idrossilasi (TH), per fibre simpatiche adrenergiche. Lo studio è stato condotto su biopsie cutanee provenienti da 16 pazienti (5 PD, 6 MSA e 5 DLB). I campioni sono stati analizzati mediante doppia IF per valutare la colocalizzazione della Ser129p-α-syn con i diversi marcatori neuronali citati, utilizzando PGP9.5 (pan-neuronale) come riferimento per l’identificazione delle fibre nervose associate agli annessi cutanei (fasci, vasi, ghiandole, bulbi, e plessi sottoepidermici). Le immagini sono state acquisite con microscopia confocale e analizzate con software di ricostruzione 3D. I risultati hanno evidenziato una distribuzione di depositi di Ser129p-α-syn nelle fibre nervose variabile tra i diversi gruppi. In particolare, in PD e DLB le positività sono state riscontrate in fibre nervose di fasci, vasi, ghiandole e plessi sottoepidermici. Invece, nei pazienti con MSA i depositi sono apparsi prevalentemente a livello dei fasci nervosi e dei plessi sottoepidermici, senza coinvolgimento delle fibre associate ai vasi. Lo studio ha inoltre evidenziato che in PD e DLB i depositi erano associati a differenti fibre nervose (TH+, NPY+, CGRP+ e VIP+), mentre nelle MSA la colocalizzazione con le fibre TH+ e NPY+ è risultata pressoché assente, suggerendo un diverso pattern di coinvolgimento delle componenti autonomiche periferiche. Per le MSA, inoltre si sono osservati depositi non colocalizzanti con i marcatori utilizzati, suggerendo il coinvolgimento di altre componenti cellulari del nervo, come le cellule di Remak. Nel complesso, questi risultati indicano che la deposizione cutanea di Ser129p-α-syn nelle sinucleinopatie coinvolge differenti sottotipi di fibre nervose periferiche e presenta pattern di distribuzione distinti tra PD, DLB e MSA, implicando differenze nei meccanismi patogenetici e nella diffusione periferica della patologia. Tali dati rafforzano il potenziale della biopsia cutanea non solo come strumento diagnostico, ma anche come biomarker utile alla diagnosi differenziale, in particolare nelle fasi precoci della malattia